目的：探索高原环境下动物肝细胞的体外分离方法；方法：采用胶原酶体外两步灌流法先进行肝叶灌流，再将所得肝组织悬液分别置37℃温育不同时间，对比观测肝细胞产量、存活率、纯度及细胞接种后生长情况的差异；结果：未经温育组及温育10min、30min、60min组肝组织悬液的肝细胞产量分别为(0.85、2.67、3.84、4.29)×106／g湿重肝组织；肝细胞存活率分别为97.6％、96.9％、88.3％及71.5％；肝细胞纯度分别为96.2％、95.4％、96.7％及95.8％；前两组细胞贴壁生长和增殖情况均较好，后两组则较差；结论：在高原环境下先采用肝叶体外两步灌流后再行胶原酶短时间(10min左右)温育处理是一种既可获得较满意的细胞活性，同时又可显著提高细胞产量的分离肝细胞方法。