【摘 要】
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利用基因工程技术构建表达载体并电转化至毕赤酵母中,成功实现人源EC-SOD在毕赤酵母X33中的表达.重组蛋白经盐酸羟胺法测得25 mL摇瓶发酵液上清酶活为508 U·mg-1,5 L发酵液
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(31071497,31271859)
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利用基因工程技术构建表达载体并电转化至毕赤酵母中,成功实现人源EC-SOD在毕赤酵母X33中的表达.重组蛋白经盐酸羟胺法测得25 mL摇瓶发酵液上清酶活为508 U·mg-1,5 L发酵液上清酶活为909U·mg-1.发酵液上清用硫酸铵沉降后,使用DEAE弱阴离子交换树脂初步分离纯化出较纯的EC-SOD,测得比活为1 700 U·mg-1,并进行氯化硝基四氮唑蓝（NBT）活性定性染色.结果表明,毕赤酵母成功胞外表达具有一定活性的SOD蛋白.
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