【摘 要】
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目的:通过观察乙酸铅[lead acetate,Pb(Ac)2]对革兰氏阴性菌内毒素脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)介导大鼠原代小胶质细胞氧化应激反应的影响,探索中枢神经系统小胶质细胞对铅与内毒素产生的反应或后果.方法:随机将培养后的小胶质细胞分为阴性对照组(Control组)、LPS组(100 ng/ml LPS)、不同浓度Pb(Ac)2组1(20、50、100 μM)、LPS+Pb(Ac)2组[20、50、100 μM Pb(Ac)2+100 ng/ml LPS]及不同浓度 Pb
【机 构】
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大理大学药学院,云南 大理671000;昆明市第四人民医院暨安宁市第一人民医院,云南 安宁 650302;大理大学第七附属医院,云南 安宁650302
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目的:通过观察乙酸铅[lead acetate,Pb(Ac)2]对革兰氏阴性菌内毒素脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)介导大鼠原代小胶质细胞氧化应激反应的影响,探索中枢神经系统小胶质细胞对铅与内毒素产生的反应或后果.方法:随机将培养后的小胶质细胞分为阴性对照组(Control组)、LPS组(100 ng/ml LPS)、不同浓度Pb(Ac)2组1(20、50、100 μM)、LPS+Pb(Ac)2组[20、50、100 μM Pb(Ac)2+100 ng/ml LPS]及不同浓度 Pb(Ac)2组2(10、20、50、100、200、500、1 000、2 000μM),置37℃、5％C02培养箱中孵育24h1或36h1,采用光学或免疫荧光显微镜观察或鉴定细胞,用MTT法检测铅作用后细胞存活率,用Griess Assay检测细胞分泌一氧化氮(nitric oxide,NO)情况、Western blot检测诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的表达水平.结果:LPS单用介导小胶质细胞24 h后,可使NO、iNOS水平上调(P＜0.05);LPS与Pb(Ac)2共孵育后,NO水平下调(P＜0.05),且iNOS与NO有一致性下调趋势;细胞生长状况随着铅浓度增加而出现损害现象,如细胞聚集、胞膜不完整、轮廓不清、粘合成团,核仁模糊不清;小胶质细胞存活率随Pb(Ac)2浓度的增加而下降.结论:LPS可导致原代小胶质细胞发生氧化应激反应,与Pb(Ac)2合用见氧化应激产物下调,似乎呈“保护”作用,但细胞形态学及细胞存活率呈现不良变化,与NO或iNOS的减少有“分离现象”.
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