【摘 要】
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目的 了解铁过载对成骨细胞铁稳态及生物活性的影响.方法 34℃条件下体外培养人成骨细胞(hFOB1.19),以不同浓度(50、100、200 μmol/L)枸橼酸铁铵(FAC)干预,用RT-PCR检测成骨
【机 构】
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苏州大学附属第二医院骨科,苏州大学公共卫生学院,南京大学附属鼓楼医院骨科
【基金项目】
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苏州市科技基础设施建设计划之高技术重点实验室资助项目;国家自然科学基金;江苏省自然科学基金
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目的 了解铁过载对成骨细胞铁稳态及生物活性的影响.方法 34℃条件下体外培养人成骨细胞(hFOB1.19),以不同浓度(50、100、200 μmol/L)枸橼酸铁铵(FAC)干预,用RT-PCR检测成骨细胞铁调节基因膜转铁蛋白(FPN1)、转铁蛋白受体(TfR)和二价金属转运蛋白1 (DMT1)表达的变化；用激光共聚焦扫描显微镜(CLSM)观察成骨细胞铁离子荧光强度；流式细胞仪检测成骨细胞活性氧(ROS)水平；碱性磷酸酶活性试剂盒检测碱性磷酸酶活性；Von kossa染色法行钙结节染色.结果 与对照组相比,FAC干预48 h后FPN1 mRNA的表达随FAC干预浓度增加呈剂量依赖性上调,TfR、DMT1 mRNA的表达呈剂量依赖性下调(P＜0.05)；FAC 干预48 h后成骨细胞铁离子荧光强度剂量依赖性减弱,与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05)；48 h后成骨细胞ROS水平随FAC干预浓度增加呈剂量依赖性升高(P＜0.05)；FAC干预10d后各组成骨细胞碱性磷酸酶活性均随FAC浓度增高而降低,差异有统计学意义(P ＜0.05)；与对照组相比,FAC干预17 d后成骨细胞钙结节染色显示矿化面积和钙结节形成随FAC浓度增加而减少.结论 铁过载对成骨细胞生物活性有明显抑制作用,其机制可能与细胞内铁离子浓度增加及活性氧水平升高有关.
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