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探讨I型人类免疫缺陷病毒(HIV-1)包膜糖蛋白(Env) gp120的CD4结合位点(CD4BS)核心区第423、425和431位氨基酸三联突变ING/MKE对其诱导体液免疫反应的影响。
方法构建HIV-1原代毒株06044包膜gp120 ING/MKE三联突变表达载体pcT22-06044gp120T-ING/MKE(gp120T-ING/MKE)，在体外转染的HEK293T细胞表达三聚化野生型gp120Twt蛋白和突变体gp120T-ING/MKE蛋白。免疫BALB/c小鼠后检测结合抗体、中和抗体和骨髓抗原特异性浆细胞。
结果获得真核表达载体gp120T-ING/MKE。转染后，在293T细胞培养上清中检测到了三聚化重组蛋白。末次免疫后14 d，gp120Twt和gp120T-ING/MKE免疫血清中结合抗体滴度都大于1∶1 000，但两组血清抗体滴度无显著差异。突变体组骨髓特异性浆细胞分泌水平和非特异浆细胞水平均低于野生型gp120免疫组。野生型和突变体免疫诱导血清抗体的中和活性均不强。
结论HIV-1包膜蛋白CD4结合区423、425和431位三联突变没有改善gp120蛋白的免疫原性。