【摘 要】
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目的:建立双内标PCR-ELISA定量检测方法,并进行标定评价.方法:制备了两种与HIV-1野生扩增片段等长的PCR内参照HS和LS,设计了一对HIV-1基因组gag区基因扩增引物,下游引物的5’端用地
【机 构】
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福建师范大学生命科学学院发育生物学教研室,福建省高校发育与神经生物学重点实验室
【基金项目】
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福建省科技攻关重点项目(2001Z041)
论文部分内容阅读
目的:建立双内标PCR-ELISA定量检测方法,并进行标定评价.方法:制备了两种与HIV-1野生扩增片段等长的PCR内参照HS和LS,设计了一对HIV-1基因组gag区基因扩增引物,下游引物的5’端用地高辛修饰,可同时扩增115bp左右的野生型和两种内参照片段.设计三套捕获探针,其5’端用生物素(Biotin)修饰,可分别与竞争PCR产物中的野生片段和两种突变型片段杂交.同一反应管内,加入已知量但不同浓度的两种内参照及待测HIV-1DNA标准品,它们将以相同的效率在同一个PCR管内被同时扩增并标记,酶联杂
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