LINC00294调控HPV18+宫颈癌细胞生长的机制

来源 :中国微生态学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jf_long
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目的探讨LINC00294靶向调控微小RNA-21(miR-21)对人乳头状瘤病毒(HPV)18阳性(+)宫颈癌细胞(HPV18+ HeLa)增殖与凋亡的影响。方法收集2018年4月至2021年5月在本院就诊的63例宫颈癌患者的宫颈癌组织标本,其中35例标本为HPV18-,28例标本为HPV18+,使用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测宫颈癌组织中LINC00294、miR-21表达水平;体外培养人宫颈癌细胞株HPV18+ HeLa,将其分为对照组、LINC00294-pcDNA组、pcDNA组、miR-21inhibitor组、NCinhibitor组、LINC00294-pcDNA+miR-21mimics组、LINC00294-pcDNA+miRNC组,使用RT-qPCR法检测各组HPV18+ HeLa细胞LINC00294、miR-21表达情况;应用双荧光素酶报告基因实验验证LINC00294与miR-21的靶向关系;应用CCK-8法检测各组HPV18+ HeLa细胞增殖情况;使用流式细胞术检测各组HPV18+ HeLa细胞凋亡情况;应用免疫印迹法(Westernblotting)检测各组HPV18+ HeLa细胞CyclinD1、Bax、Bcl-2蛋白表达。结果与HPV18-宫颈癌组织比较,HPV18+宫颈癌组织中LINC00294表达水平显著降低,miR-21表达水平显著升高(均P<0.05)。经生物信息学(starBasev2.0)分析显示,LINC00294与miR-213’UTR区有结合位点,且经双荧光素酶报告基因实验验证,LINC00294与miR-21存在靶向关系。过表达LINC00294或抑制miR-21表达,HPV18+ HeLa细胞A值、CyclinD1、Bcl-2蛋白及miR-21表达水平显著下降,细胞凋亡率、Bax蛋白表达水平显著升高(均P<0.05);过表达miR-21可部分逆转过表达LINC00294对HPV18+ HeLa细胞的增殖抑制作用和凋亡促进作用。结论HPV18+宫颈癌组织中LINC00294表达水平显著降低,过表达LINC00294可抑制miR-21表达,抑制HPV18+宫颈癌细胞增殖,促进细胞凋亡。
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