探讨Beclin－1、P62/SQSTM1、微管相关蛋白1轻链3(LC3)和unc－51样自噬活化激酶1(ULK－1)等自噬相关分子mRNA水平在发育期大鼠癫痫脑损伤前后的变化。
方法21日龄雄性Sprague Dawley(SD)大鼠72只，按随机数字表法随机分为对照组和癫痫组。每组按时间点不同(3 h、6 h、12 h和48 h)随机分4个亚组，每个亚组9只大鼠。癫痫组采用腹腔注射卡因酸(12 mg/kg)诱导癫痫发作建立癫痫动物模型，对照组予等量9 g/L盐水腹腔注射。2组大鼠分别于注射卡因酸3 h、6 h、12 h和48 h后，予水合氯醛麻醉，处死并取出脑组织。Nissl染色法检测大鼠大脑皮层神经元损伤情况；脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测癫痫大鼠大脑神经元凋亡情况；实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测Beclin－1、P62/SQSTM1、LC3、ULK－1 mRNA水平。
结果Nissl染色显示：随时间推移，癫痫组大鼠大脑皮层神经元尼氏体颜色变浅，结构紊乱；癫痫48 h组Nissl染色阳性细胞数[(82±8)个]明显少于对照组[(122±8)个]，差异有统计学意义(F＝3.768，P＝0.01)。TUNEL方法显示癫痫48 h组大鼠大脑皮层凋亡神经元[(13±7)个]明显高于对照组[(2±1)个]，差异有统计学意义(t＝－3.821，P＝0.003)。qPCR显示Beclin－1、P62/SQSTM1、LC3、ULK－1 mRNA水平在癫痫组12 h组(1.70±0.75、1.75±0.77、1.52±0.43、7.48±6.12)和癫痫48 h组(1.63±0.43、1.48±0.74、1.74±0.55、7.69±5.65)均明显高于对照组(1.00、1.00、1.00、1.00)，差异均有统计学意义(F＝2.820、3.452、5.811、5.002，均P<0.05)。
结论自噬的活化先于凋亡发生，自噬相关分子可能参与发育期大鼠癫痫所致脑损伤的发病过程。