小激活RNA介导的大鼠肝细胞株BRL中诱导型一氧化氮合酶上调表达的研究

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gmzz2009
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目的 应用RNA激活技术激活大鼠肝细胞株BRL中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因的表达,筛选出有效的激活序列,进一步证明了该现象普遍存在于哺乳动物细胞中.方法 设计并合成了4条靶向大鼠iNOS基因启动子DNA序列互补的双链RNA分子(saRNA-1、saRNA-2、saR-NA-3及saRNA-co),脂质体法转染BRL细胞.转染后收集转染后细胞,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测iNOS的表达.结果大鼠肝细胞株BRL转染羟基荧光素(FAM)标记的saRNA后,70%以上细胞内有绿色荧光表达.转染72 h半定量RT-PCR检测显示saRNA-2转染后能够激活BRL细胞iNOS基因的表达,其他saRNA转染后未见激活现象.结论 利用RNA激活技术可成功激活大鼠肝细胞BRL细胞株iNOS基因的表达。

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