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目的 探索简便、高效原代培养大鼠远端肺动脉平滑肌细胞的方法,为研究肺动脉高压发病机制提供实验材料.方法 采用显微操作和分次酶消化法进行原代培养并与传统酶消化法比较.对培养的细胞进行形态学观察、平滑肌α-actin免疫荧光细胞化学法鉴定、激光扫描共聚焦显微镜计算纯度.结果 两种酶消化法均可获得高纯度的远端肺动脉平滑肌细胞.镜下细胞呈典型的"峰-谷"状生长,胞质特异的α-actin阳性表达,细胞纯度达98%.分次酶消化法获得的细胞数及细胞存活率均大于传统酶消化法,并且提前了3 d得到足够进行实验的细胞数量.结论 本法简便、可靠、低成本,短期内可获得大量高纯度、功能良好的远端肺动脉平滑肌细胞。