【摘 要】
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目的:检测樟脑(C10H16O)处理MRC-5细胞对p53基因mRNA表达水平的影响.方法:DMEM培养基培养MRC-5细胞,设试验组和对照组.1×105细胞/孔的细胞密度接种于6孔板,每组设三复孔,180
【机 构】
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泸州医学院,医学基础研究中心,四川泸州 646000泸州医学院,附属医院心胸外科,四川泸州 646000;
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目的:检测樟脑(C10H16O)处理MRC-5细胞对p53基因mRNA表达水平的影响.方法:DMEM培养基培养MRC-5细胞,设试验组和对照组.1×105细胞/孔的细胞密度接种于6孔板,每组设三复孔,180μg·ml-1的樟脑分别作用MRC-5细胞24h和48h. MTT法测定细胞相对增殖百分率.提取细胞总RNA,逆转录得cDNA. GAPDH mRNA作为内参,p53/GAPDH mRNA为相对表达量,反转录半定量聚合酶链式反应(SQ-PCR)分析MRC-5细胞中p53表达水平,试验重复三次.结果:180μg·ml-1樟脑作用MRC-5细胞24h和48h后,细胞相对增殖百分率均高于90%.给药24h,对照组和试验组MRC-5细胞p53 mRNA表达水平分别为0.81±0.24和0.56±0.13(P>0.05).给药48h,对照组和试验组MRC-5细胞p53 mRNA表达水平分别为0.76±0.11和1.08±0.19(P>0.05).给药24h和48h,试验组MRC-5细胞p53 mRNA表达水平差异有统计学意义(P<0.05).结论:180μg·ml-1浓度的樟脑对MRC-5为安全给药浓度.给药后MRC-5细胞p53 mRNA表达水平上调有统计学意义,提示樟脑可能间接影响p53基因的表达调控.
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