【摘 要】
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将猪流行性腹泻病毒(PEDV)流行毒株S1基因经密码子优化后克隆到慢病毒表达载体,在293T细胞包装PEDV S1重组慢病毒;重组慢病毒感染293T细胞,经有限稀释法筛选获得高效稳定表达
【机 构】
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吉林农业大学,吉林长春130000;南方医科大学,广东广州510000;广州伯尼兹生物科技有限公司,广东广州 510000;南方医科大学,广东广州510000;吉林农业大学,吉林长春130000
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将猪流行性腹泻病毒(PEDV)流行毒株S1基因经密码子优化后克隆到慢病毒表达载体,在293T细胞包装PEDV S1重组慢病毒;重组慢病毒感染293T细胞,经有限稀释法筛选获得高效稳定表达S1蛋白的重组细胞系HEK-293T-S1;生产、纯化S1蛋白,添加佐剂制备成重组S1亚单位疫苗,经肌肉注射免疫实验用巴马小型猪,评价重组S1蛋白的免疫原性.结果 表明,疫苗经肌肉注射免疫能诱导唾液、粪便及血清产生S1特异性IgA;证实巴马小型猪3日龄仔猪对PEDV流行毒株易感,在临床症状及组织病理学变化均符合高毒力PEDV特征,可以作为感染动物模型;在实验用巴马小型猪证实PEDV重组S1蛋白结合佐剂经肌肉注射可诱导粘膜免疫,这为PEDV基因工程疫苗研发奠定了基础.
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