目的 观察氢氧化钙对人牙髓细胞中骨涎蛋白基因转录的影响,研究氢氧化钙诱导矿化的机制,为研制更有效的盖髓剂提供实验依据.方法 收集天津医科大学口腔医院口腔颌面外科门诊因正畸拔除的双尖牙15颗,提取牙髓组织并进行细胞培养,将培养传代的人牙髓细胞分成不同浓度(0.012、0.120、0.400和1.200 mmol/L)氢氧化钙实验组和对照组,提取总RNA,通过实时定量聚合酶链反应实验,检测确定人牙髓细胞中氢氧化钙对骨涎蛋白mRNA水平的最佳刺激浓度.同时,检测最佳浓度氢氧化钙在不同时间点(0、3、6、12和24 h)对骨涎蛋白、核心结合蛋白因子2(runt-related transcription factor-2,Runx-2)和成骨细胞特异性转录因子(osterix,OSX) mRNA水平的影响；通过瞬时转染实验,将人骨涎蛋白基因不同长度片段的启动子插入荧光素酶基因中,通过脂质体瞬时转染进人牙髓细胞,检测骨涎蛋白启动子在氢氧化钙实验组和对照组中转录活性的变化.组内和组间比较均采用两独立样本t检验,以双侧P＜ 0.05为差异有统计学意义.结果 实时定量聚合酶链反应实验中,最佳刺激浓度1.200 mmol/L氢氧化钙作用人牙髓细胞12h后,骨涎蛋白mRNA的水平增长为(2.86±0.09),而1.200 mmol/L氢氧化钙在不同的时间点(0、3、6、12和24 h)刺激细胞,骨涎蛋白mRNA水平6h时为(1.45±0.36),12 h时增长到(2.66±0.18)；Runx-2 mRNA水平在6h时为(2.38±0.08),12h时增长到(2.73±0.16),24 h时下降至初始水平；OSX mRNA的水平从12 h开始增长,24 h达峰值(3.30±0.06).瞬时转染实验也证实了氢氧化钙刺激人牙髓细胞12h后,人骨涎蛋白基因- 84LUC ～ - 868LUC启动子转录活性氢氧化钙刺激组比对照组增强了2.00～2.60倍.结论 氢氧化钙诱导矿化中增强了人骨涎蛋白基因的转录,转录位点可能位于人骨涎蛋白基因启动子的- 84 ～ - 868区域。