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目的构建人巨细胞病毒（HCMV）pp65基因片段（363～505位氨基酸）的原核表达质粒，并鉴定所表达蛋白的反应原性。方法以含有HCMVpp65全长基因的pGEM-T-pp65质粒为模板，PCR扩增pp65基因第1087～1515位核苷酸片段，酶切后插入pET-21a（＋）载体，转化大肠杆菌BL21（DE3）。经IPTG诱导表达，纯化后进行Western blot鉴定。结果酶切分析和测序证明原核表达质粒pET-21a（＋）-pp65构建正确。表达的融合蛋白主要以包涵体形式存在，以1．0mmol／LIPTG