【摘 要】
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目的 探讨离体经肺静脉灌注途径转染目的 基因的可行性,观察移植肺局部转染人白细胞介素(hIL)-10基因对移植肺缺血再灌注损伤(IRI)的影响.方法 采用改良的三袖套法建立大鼠左
【机 构】
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福建医科大学附属协和医院胸外科,福建医科大学附属协和医院心外科,福建医科大学分子医学研究中心,福建医科大学附属协和医院病理科
【基金项目】
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福建省高等学校新世纪优秀人才支持计划基金;
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目的 探讨离体经肺静脉灌注途径转染目的 基因的可行性,观察移植肺局部转染人白细胞介素(hIL)-10基因对移植肺缺血再灌注损伤(IRI)的影响.方法 采用改良的三袖套法建立大鼠左肺原位移植模型,移植前供肺离体经肺静脉逆行灌注5×109 PFU/ml hIL-10基因重组的腺病毒载体(转基因组),保存3 h后移入受鼠;另设空载体对照组、空白对照组和假手术对照组.再灌注后4 h,测定动脉血PaO2;检测移植肺湿-干重比率(W/D)、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、髓过氧化物酶(MPO)活性;观察组织学改变;采用RT-PCR法和免疫组化染色法检测移植肺hIL-10基因的表达情况,酶联免疫吸附法(ELISA)测定移植肺肿瘤坏死因子(TNF)-α、干扰素(IFN)-γ的表达水平.结果 空载体对照组和空白对照组出现明显的移植肺IRI,转基因组移植肺IRI明显减轻,PaO2提高、W/D比率降低、MDA含量和MPO活性下降(P＜0.01)、SOD活性升高(P＜0.05);转基因组移植肺TNF-α、IFN-γ的表达下调(P＜0.01),肺泡间质水肿减轻,炎细胞浸润减少,并有外源性hIL-10基因的表达.结论 (1)离体供肺经肺静脉灌注途径转染外源性基因有效可行;(2)腺病毒介导hIL-10转基因能有效地减轻移植肺IRI,改善早期移植肺功能.
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