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目的构建我国流行的周期型马来丝虫半胱氨酸蛋白酶(BmCP)基因原核和真核表达质粒,为进一步研究奠定基础。方法从周期型马来丝虫虫体中提取总RNA,反转录成cDNA,设计合成引物,以eDNA为模板,通过PCR从eDNA中扩增出目的基因,扩增产物经初步鉴定后将其克隆入pMD18-T载体,进行双酶切及PCR扩增鉴定,获得阳性重组质粒,进行测序分析和同源性比较。阳性克隆的质粒亚克隆至真核表达质粒peDNA3.1(+),转化感受态大肠埃希菌(E-coli)DH5α,筛选阳性克隆,用PCR和双酶切鉴定阳性重组子。结果R