【摘 要】
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本研究旨在验证通过测序与预测分析靶向奶牛乳腺 κ-酪蛋白(CSN3)的miRNA.应用乳腺组织的小RNA测序、TargetScan预测和RNAhybrid分析,筛选了4个可能靶向CSN3的miRNA,分别是bta?miR?33a、bta?miR?2284ab、bta?miR?193b和bta?miR?193a?3p.接着,通过荧光素酶报告试验检测CSN3?3\'非编码区(3\'UTR)和4种miRNA的结合情况,结果表明只有bta?miR?193b和bta?miR?193a?3p能与CSN3?3
【机 构】
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河南农业大学生命科学学院,郑州 450002;河南省农业科学院畜牧兽医研究所,郑州 450002
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本研究旨在验证通过测序与预测分析靶向奶牛乳腺 κ-酪蛋白(CSN3)的miRNA.应用乳腺组织的小RNA测序、TargetScan预测和RNAhybrid分析,筛选了4个可能靶向CSN3的miRNA,分别是bta?miR?33a、bta?miR?2284ab、bta?miR?193b和bta?miR?193a?3p.接着,通过荧光素酶报告试验检测CSN3?3\'非编码区(3\'UTR)和4种miRNA的结合情况,结果表明只有bta?miR?193b和bta?miR?193a?3p能与CSN3?3\'UTR结合(P<0.01).牛奶体细胞相关基因表达趋势进一步验证了bta?miR?193b和bta?miR?193a?3p与CSN3的靶向关系.这些结果提示,bta?miR?193b和bta?miR?193a?3p可直接靶向CSN3,这可以解释从泌乳高峰期至泌乳后期牛奶中CSN3蛋白总量的减少.本试验结果为乳蛋白的调控研究提供了依据,并为miRNA的功能研究铺垫了道路.
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