目的 摸索适合抗破伤风毒素抗体重组CHO工程细胞株生长和抗体蛋白表达的降温温度，为细胞培养工艺的建立提供参考。方法 在体积为125 mL的培养瓶中，按50万个/mL的初始密度接种CHO工程细胞种子，采用补料分批培养模式，在转速125r/min，CO2浓度5.0%，湿度80%的温控培养摇床中进行细胞培养。对照组培养温度设定为37 ℃恒温；试验组初始培养温度设定为37 ℃，待培养瓶中的细胞密度达到1000万个/mL时，将培养瓶分别转到35 ℃、34 ℃和33℃的摇床继续培养。每日取样，分别检测培养液的活细胞密度、细胞活率、葡萄糖、乳酸、NH4+、渗透压和抗体蛋白滴度。当细胞活率＜80%时，停止培养。与对照组比较，选择细胞生长较好，代谢副产物浓度较低且抗体蛋白滴度最高的温度为最终降温温度。结果 对照组的最高活细胞密度为2000万个/mL，试验组37 ℃转到35 ℃、37 ℃转到34℃和37℃转到33℃培养条件下的最高活细胞密度分别为2210万、1940万和1890万个/mL；与对照组相比，试验组培养后期的细胞活率维持较高水平；葡萄糖、乳酸和NH4+代谢趋势一致，且试验组代谢副产物乳酸和NH4+浓度低于对照组；各培养组渗透压变化趋势一致，都在可接受范围内；最终抗体蛋白滴度对照组为1 196 mg/L，试验组37℃转到35 ℃、37 ℃转到34 ℃和37 ℃转到33 ℃的分别为1 772、1 962和1929mg/L。结论选取34 ℃为破伤风毒素抗体重组CHO工程细胞株的降温培养温度，进行后续培养工艺的建立。