【摘 要】
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目的:建立脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞的炎症模型,筛选喜碱鸢尾根水提取物抗炎活性部位,并进行化学成分分析.方法:水提醇沉法提取,AB-8型大孔吸附树脂色谱法分离上清液,得上清液浸膏和水,20％乙醇,40％乙醇,60％乙醇洗脱物(YWG,YWG-0％,YWG-20％,YWG-40％,YWG-60％),细胞增殖与活性检测(CCK-8)法测定上清液和不同体积分数乙醇洗脱物对RAW264.7细胞活力的影响,Griess和酶联免疫吸附(ELISA)法分别测定细胞上清液中一氧化氮(NO),肿瘤坏死因子(T
【机 构】
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新疆医科大学药学院,乌鲁木齐830011
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目的:建立脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞的炎症模型,筛选喜碱鸢尾根水提取物抗炎活性部位,并进行化学成分分析.方法:水提醇沉法提取,AB-8型大孔吸附树脂色谱法分离上清液,得上清液浸膏和水,20％乙醇,40％乙醇,60％乙醇洗脱物(YWG,YWG-0％,YWG-20％,YWG-40％,YWG-60％),细胞增殖与活性检测(CCK-8)法测定上清液和不同体积分数乙醇洗脱物对RAW264.7细胞活力的影响,Griess和酶联免疫吸附(ELISA)法分别测定细胞上清液中一氧化氮(NO),肿瘤坏死因子(TNF)-α及白细胞介素(IL)-6,IL-10,IL-1β的水平.采用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱法(UHPLC-QTOF-MS/MS)对YWG及抗炎活性最强部位进行成分辨识和比较.结果:不同体积分数乙醇洗脱物对LPS诱导的RAW264.7细胞上清液中的NO,TNF-α,IL-1β,IL-6的释放均有明显抑制作用(P＜0.05),对IL-10的释放具有明显促进作用(P＜0.05),且YWG-60％洗脱物作用极为显著(P＜0.01).采用UHPLC-QTOF-MS/MS技术对YWG及YWG-60％进行比较分析,正负离子模式共检出127种物质,其中黄酮类物质61种.与YWG相比,YWG-60％中含量升高的黄酮类化合物有25种.结论:喜碱鸢尾根YWG-60％具有显著抗炎作用,且推测抗炎有效成分主要为黄酮类化合物,该研究为阐明喜碱鸢尾根水提物药效物质基础提供了一定科学理论数据.
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