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以Fe3O4纳米粒子为载体，碳化二亚胺为交联剂，共价结合制备固定化脂肪酶，探讨脂肪酶固定化影响因素，并对固定化脂肪酶性质进行研究；运用TEM测定其粒径，用FTIR检测脂肪酶-Fe3O4磁性纳米粒子耦联。结果表明，脂肪酶固定化适宜条件为：200mg磁性纳米粒子，加入2ml2．5mg／mL脂肪酶磷酸盐缓冲液（0．1mol／L，pH7．5），在4℃超声分散45min，固定化酶最适pH为7．0，最适温度为45℃。均与游离酶相似；与游离酶相比，该固定化脂肪酶热稳定性明显提高，并具有良好操作和存储稳定性。