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目的 构建表达HCV非结构蛋白3(NS3)的重组腺病毒RAd/NS3,探讨其免疫小鼠后诱导机体产生特异性免疫应答的能力.方法 PCR扩增编码NS3蛋白(329～935位氨基酸)的基因片段,定向克隆至重组腺病毒AdEasy-1系统的穿梭质粒pAdTrack-CMV上,与腺病毒基因组质粒pAdEasy-1共转化BJ5183菌,利用细菌内同源重组获得重组腺病毒质粒,转染293细胞,以包装、扩增重组腺病毒.将重组腺病毒以1×108 pfu剂量经皮下注射免疫BALB/c小鼠,并以100 μg重组质粒pRC/NS3经肌内注射途径免疫小鼠为对照.ELISA法检测免疫小鼠血清抗体水平,51Cr释放法检测免疫小鼠细胞毒性T淋巴细胞体外杀伤功能.结果 重组腺病毒经皮下免疫小鼠后可刺激机体产生较强的特异性体液免疫应答和细胞免疫应答,且免疫效果强于重组质粒pRC/NS3组,初次免疫后2周,前者20只小鼠抗-HCV全部阳转,而后者10只小鼠仅3只阳转,未观察到明显的不良反应.结论 表达HCVNS3抗原的重组腺病毒载体疫苗能够诱导机体产生有效的体液和细胞免疫应答。