【摘 要】
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目的建立小鼠血清中弓形虫Peroxiredoxin(Prx)抗原的间接ELISA检测方法。方法应用棋盘滴定法确定最佳被检血清包被浓度、一抗和二抗稀释度及封闭液,绘制蛋白定量标准曲线,并
【机 构】
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山西医科大学寄生虫学教研室,山西医科大学流行病学教研室,遵义医学院珠海校区,
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目的建立小鼠血清中弓形虫Peroxiredoxin(Prx)抗原的间接ELISA检测方法。方法应用棋盘滴定法确定最佳被检血清包被浓度、一抗和二抗稀释度及封闭液,绘制蛋白定量标准曲线,并对建立的间接ELISA法进行验证。结果间接ELISA的最佳条件为:被检血清包被浓度为1:50,抗TgPrx阳性大鼠血清稀释度为1:100(效价1:128),酶标二抗稀释度为1:4000,封闭剂对实验结果的影响不大。该方法灵敏度高、重复性好、特异性强,检测30份弓形虫感染小鼠血清的检出率为100%。结论已建立了小鼠血清中弓形虫Prx抗原间接ELISA检测方法,可用于弓形虫病的诊断及流行病学调查。
Objective To establish an indirect ELISA for detection of Peroxiredoxin (Prx) antigen in mouse sera. Methods The chemostat titration method was used to determine the optimal serum concentration, primary antibody and secondary antibody dilution and blocking solution, and the protein standard curve was drawn. The established indirect ELISA method was validated. Results The optimal conditions of indirect ELISA were as follows: serum concentration of 1:50, serum dilution of anti-TgPrx positive rat was 1: 100 (titer of 1: 128), dilution of ELISA secondary antibody was 1: 4000 , Blocking agent has little effect on the experimental results. The method has high sensitivity, good repeatability and high specificity. The detection rate of sera from 30 Toxoplasma gondii infected mice was 100%. Conclusions Indirect ELISA for the detection of Toxoplasma gondii in mice serum has been established and can be used for the diagnosis and epidemiological investigation of toxoplasmosis.
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