2018-2019年福建省人感染布鲁氏菌分离株种型鉴定及分子特征分析

来源 :中国病原生物学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:akiheeca
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的 探讨福建省人感染布鲁氏菌分离株主要流行株的种型和分子特征,为制定预防控制策略提供依据.方法 将布鲁氏菌分离株转种培养并提取基因组DNA,采用传统生物学鉴定和BCSP31-PCR、AMOS-PCR、MLST及MLVA-16等方法进行布鲁氏菌分离株分子鉴定和分型,通过Bionumerics 6.6软件对其进行聚类分析.结果 2018-2019年福建省人感染布鲁氏菌22株分离株分子检测结果与传统分型基本相符,为2个种(羊种和猪种)和2个生物型(羊3型和猪3型),其中羊种布鲁氏菌占多数(95.45%);20株布鲁氏菌分离株MLST基因型为ST8,1株为ST17型,1株为新的ST型:ST99的gap基因与已报道的等位基因型不同,被定义为一个新的等位基因型gap(32).MLVA-16分型为羊种和猪种2个种群,21株羊种布鲁氏菌分为17种基因型,1株猪种布鲁氏菌分为1种基因型,其中15种基因型为单分离株,3种基因型为共享基因型(共7株,占31.82%).聚类分析显示福建分离株与内蒙古、辽宁、山东和广东地区存在4种共享基因型,均为羊种布鲁氏菌,其他部分菌株与外省菌株遗传距离较近.结论 福建省布鲁氏菌主要流行株为ST8型,且MLVA-16分型显示呈高度基因多样性.MLST/MLVA作为传统生物学鉴定补充技术方法,可用于布鲁氏菌遗传多样性分析和分子流行病学溯源调查,以提高布鲁氏菌病监测能力.
其他文献
二氧化碳激光器(carbon dioxide laser)的临床应用已有近四十年的历史.现有的医用CO2激光设备的种类和规格繁多,适于CO2激光器治疗的病种多,使用的科室也较多,是激光医学领域的一种重要的治疗技术和设备.本文对CO2激光器的基本原理、结构、性质和医学应用做一系统综述.
白癜风是一种常见的、难治性色素性皮肤病,临床表现为局部色素脱失,在我国的患病率为0.1%~2.7%.病因目前尚不明确,严重影响患者容貌和心理[1].目前,白癜风的治疗方法多种多样,包括维生素D衍生物、免疫调节剂、皮质类固醇激素、光疗及手术自体移植等,但单一方法均无满意疗效,临床上多采用联合治疗[2],目的主要是控制色素脱失斑的进展.光物理治疗(主要有紫外线、红外线和剥脱性点阵激光等)联合药物治疗白癜风是近年来皮肤性疾病临床治疗的热点探索方法[3].2017年8月至2019年9月,笔者观察了高能紫外线、复方
期刊
目的 检测PRRSV病毒体外感染原代猪肺泡巨噬细胞(PAM)对猪源IFITM分子mRNA转录水平的影响.方法 无菌采集PRRSV、PCV2和JEV阴性仔猪肺脏,分离PAM并用PRRSV病毒接种感染.于感染后不同时间点收集细胞,采用PCR检测PAM细胞PRRSV感染情况,采用荧光定量PCR检测PRRSV在PAM细胞中的复制情况以及IFITM分子mRNA的转录水平变化.结果 成功分离到猪原代PAM细胞,接种PRRSV后出现明显的细胞病变.荧光定量PCR检测结果显示,PRRSV感染12h后可显著上调PAM细胞中
目的 分离进口胎牛血清中的牛病毒性腹泻-粘膜病病毒(BVDV)毒株并进行系统进化分析.方法 通过RT-PCR检测购买胎牛血清中的BVDV核酸,确定有BVDV污染后.将该血清样品接种MDBK细胞,连续传代5次,利用免疫荧光、PCR扩增、测序以及遗传进化分析等方法对其进行鉴定.结果 成功分离到1株BVDV毒株,PCR和免疫荧光检测均为BVDV阳性,命名为FBS-TL20.基于5\'UTR、Npro和E2基因序列的同源性分析表明,FBS-TL20毒株与分离自埃及新生羊体内的毒株BSU1同源性分别为99.18
目的 原核表达和纯化Tamdy病毒(TAMV)核蛋白(NP),以此为抗原建立间接ELISA方法,以期用于TAMV感染血清流行病学调查.方法 采用PCR法扩增NP基因,构建重组质粒(pET-32a-NP)并转化至E.coli BL21中诱导表达NP蛋白,15%SDS-PAGE鉴定和镍柱亲和层析纯化重组NP蛋白,以TAMV阳性羊血清为一抗,采用ELISA检测其抗原性.以纯化的pET-32a-rNP作为包被抗原,通过方阵滴定优化反应条件,建立检测TAMV血清抗体的间接ELSIA方法,评价其重复性、敏感性和特异性
目的 构建稳定表达红、绿色荧光蛋白的卡介苗(Bacille Calmette-Guerin,BCG)菌株,并建立快速定量BCG细菌数的qPCR方法.方法 电转化构建稳定表达红、绿色荧光蛋白的BCG菌株,比较其与野生菌株的生长曲线.将此荧光蛋白标记的BCG感染人源单核巨噬细胞系THP1细胞,用共聚焦显微镜观察感染吞噬效果.基于BCG 16SrRNA序列设计特异性引物,应用qPCR定量检测BCG细菌基因组DNA,根据细菌平板计数菌落数与qPCR循环数绘制标准曲线,建立qPCR定量BCG细菌数的方法.结果 构建
目的 了解山东省2019-2020年分离株A(H1N1) pdm09亚型流感病毒的抗原性及血凝素(hemagglutinin,HA)基因变异情况.方法 采用单向红细胞凝集抑制试验对2019-2020监测年分离的15株A(H1N1) pdm09亚型流感病毒进行抗原性分析;PCR扩增病毒的HA基因并测序,进行进化分析,以及糖基化位点、抗原变异位点、受体结合位点的变异分析.结果 2019-2020年流行株A(H1N1) pdm09亚型流感病毒均为疫苗株A/Brisbane/02/2018的类似株.HA基因均属于
目的 为了探究半夏泻心汤治疗幽门螺杆菌相关性胃炎作用机制,应用网络药理学方法分析半夏泻心汤治疗幽门螺杆菌相关性胃炎(HAG)的主要活性化合物、潜在靶点和相关通路.方法 运用中药系统药理学分析平台(TC-MSP)对半夏泻心汤药物活性化合物及药物作用靶点基因进行筛选.通过GeneCards数据库和OMIM数据库收集HAG疾病相关靶点,对药物作用靶点及疾病相关靶点进行韦恩分析,确定药物作用潜在靶点;应用Cytoscape 3.6.1软件以及String数据库分别构建“药物-化合物-潜在靶点”相互作用网络及蛋白相
目的 分析牛支原体(Mycoplasma bovis)核糖磷酸焦磷酸激酶(ribose-phosphate pyrophosphokinase,prsA)对宿主细胞的黏附功能.方法 参照牛支原体HB0801株prsA基因序列设计特异性引物,PCR扩增获得牛支原体武威分离株prsA基因,构建原核表达载体pET-prsA,转化人大肠埃希菌Rosetta(DE3)感受态细胞后加入IPTG诱导表达His-prsA.表达产物纯化后免疫新西兰兔,制备抗血清,应用Western blot和间接ELISA分析prsA蛋白
目的 探讨Wnt5a在卡介苗(BCG)感染肺泡上皮细胞后对细胞自噬的调控作用.方法 用BCG感染小鼠肺泡上皮细胞TC-1,分别收集感染不同时间(MOI=10)、不同浓度rhWnt5a及IWP2处理的TC-1细胞,利用Western blot检测Wnt5a及自噬相关蛋白LC3蛋白表达水平,确定TC-1细胞自噬的最佳时间以及rhWnt5a和IWP2最适浓度;利用rhWnt5a或IWP2与BCG单独或共处理TC-1,其中rhWnt5a处理试验设对照组(Control)、BCG组、rhWnt5a组和rhWnt5a