基于Nrf2/HO-1通路的加味大黄蟅虫颗粒对精索静脉曲张模型大鼠附睾生精细胞凋亡的影响

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目的:探讨加味大黄蠊虫颗粒对精索静脉曲张模型大鼠附睾组织的保护作用及与核因子NF-E2相关性因子(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白表达的关系.方法:60只SPF级SD大鼠,按随机数字表法分成假手术组、模型组、迈之灵组及加味大黄蠊虫颗粒低、中、高剂量组.采用Turner法构建精索静脉曲张大鼠模型.造模完成后,加味大黄蠊虫颗粒低、中、高剂量组分别给予浓度为0.6、1.2、2.4 g/ml的大黄蠊虫丸生药水冲剂灌胃,假手术组和模型组予以等量的生理盐水灌胃,迈之灵组则予54 mg/kg迈之灵片,以上各组灌胃体积均为1 ml/100 g,1次/d,持续8周.给药8周后全部处死以上各组大鼠,取出左侧附睾检测精子质量及观察局部显微超微结构的变化;Annexin V-FITC法检测左侧附睾生精细胞凋亡情况;免疫组织化学法检测左侧附睾组织中Nrf2、HO-1的表达.结果:模型组中左侧附睾组织内发生明显病理损伤,各级生精细胞和精子数量重度减少,细胞结构部分破坏,溶酶体、线粒体、内质网、细胞核、细胞膜等部分亚细胞结构消失,而加味大黄蠊虫颗粒各剂量组及迈之灵组中左侧附睾组织的病理损伤具有一定程度的改善.与模型组相比,加味大黄蟅虫颗粒中、高剂量组及迈之灵组大鼠左侧附睾的精子浓度及活率显著增高(P<0.05).与迈之灵组比较,加味大黄蠊虫颗粒高剂量组精子浓度及活率显著升高(P<0.05).模型组中左侧附睾生精细胞凋亡率显著高于假手术组(P<0.05),加味大黄蠊虫颗粒中、高剂量组及迈之灵组中生精细胞凋亡率显著低于模型组(P<0.05).免疫组织化学法显示,模型组大鼠左侧附睾组织中Nrf2/HO-1棕黄色阳性表达呈散在排列,且细胞辉度低;而加味大黄蠊虫颗粒高剂量组、迈之灵组中棕黄色阳性表达的细胞辉度明显提升.结论:加味大黄蠊虫颗粒可以有效修复精索静脉曲张大鼠附睾组织的病理损伤,提高Nrf2/HO-1的蛋白表达,进而拮抗生精细胞的凋亡,为精子的发育成熟提供有利条件.
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