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建立了一种新的土霉素（OTC）的比色检测方法。以具有辣根过氧化物酶活性的氯化血红素（hemin）溶液作为催化剂，以3,3＇,5,5＇-四甲基联苯胺（TMB）和双氧水（H2O2）为底物，检测其产物在波长450 nm处的吸光度值，通过吸光度变化值ΔA450 nm与土霉素含量回归方程计算样品中土霉素含量，并对实验的各个相关因素进行了优化。结果表明，最优实验条件下，在浓度0～30 nmol/L的范围内，ΔA450 nm与OTC浓度呈良好的线性关系，最低检测限度为21.89 nmol/L，通过牛奶样品的加标回收实验