论文部分内容阅读
近年的细菌耐药性监测结果发现，肺炎克雷伯菌对庆大霉素等氨基糖甙类抗生素的耐药率已达40%左右。耐药的主要机制为细菌产生N-乙酰转移酶AAC（3）-V，使其抗菌活性不能发挥。不同菌株产生的钝化酶及其编码基因有一定的差异。作者从华山医院分离的肺炎克雷伯菌耐药株，用PCR方法从该菌株的一分子量约85×103的接合型质粒上扩增出全长基因，连接pUC18，从转化子中筛选出编码乙酰转移酶AAC（3）-V的克隆。经限制性内切酶和DNA序列分析，并与来自粘质沙雷菌的基因比较，其核苷酸序列约有95%的同源性，20个氨基酸发生替换。大部分氨基酸的变异发生在C末端。该基因连接表达载体pLY4，转入大肠杆菌DH5α和JF1125，后两者对庆大霉素的抗性均获得大幅度提高。