熔解曲线法用于肺癌APC基因甲基化模式的研究

来源 :现代检验医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：liongliong587

【摘要】

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目的以熔解曲线法测定4株肺癌细胞株和肺癌病人APC基因启动子区的甲基化模式。方法以脐血淋巴细胞DNA及其转甲基后的DNA经化学修饰、克隆测序的质粒，作为完全非甲基化和完全甲

【作者】

：

高丽潘世扬陈丹张丽霞谢而付徐建黄佩珺

【机构】

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南京医科大学第一附属医院医学检验科江苏省实验诊断学重点实验室

【出处】

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现代检验医学杂志

【发表日期】

：

2012年1期

【关键词】

：

熔解曲线肺癌腺瘤性结肠息肉病甲基化 melting curve lung cancer APC gene methylation

【基金项目】

：

基金项目：国家自然科学基金（No.30972821）,江苏省实验诊断学重点实验室（No.XK200731）,江苏省卫生厅重大项目科研基金（No.H200707）,江苏省科技厅社会发展基金（No.BS2007073,No.BM2006113）.

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目的以熔解曲线法测定4株肺癌细胞株和肺癌病人APC基因启动子区的甲基化模式。方法以脐血淋巴细胞DNA及其转甲基后的DNA经化学修饰、克隆测序的质粒，作为完全非甲基化和完全甲基化标准品。设计通用引物，采用加入荧光染料SYBRGreen1的荧光定量PCR法扩增包含21个CpG位点的APC基因启动子区的目的序列，以熔解曲线法通过与完全非甲基化和完全甲基化标准品的Tm值比较，确定四株肺癌细胞株（NCI-H446，NCI-H460，SPCA1，NCI—H520）在该区段的甲基化模式，并通过克隆测序验证。同时测定两例

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