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目的本研究旨在通过检测PADI4在肿瘤中的表达特征和表达机制,初步探讨PADI4是如何参与肿瘤的发病过程的。方法 1.应用ELISA的方法检测各种恶性肿瘤患者血液中PADI4的表达水平。2.应用ELISA双抗体夹心方法检测各种恶性肿瘤患者血液中瓜氨酸化抗凝血酶的表达水平。3.应用RT-PCR的方法检测PADI4mRNA在卵巢癌组织中的表达。4.应用Taqman实时荧光定量RT-PCR的方法检测PADI4mRNA在卵巢癌组的表达量。5.应用免疫组化的方法检测PADI4蛋白在卵巢癌组织中的表达。结果 1.PADI4在乳腺癌、肝细胞癌、肺癌、食管癌、胃癌、结直肠癌、胰腺癌、卵巢癌、肾细胞癌子宫癌、前列腺癌和膀胱癌各种恶性肿瘤患者血清中与对照组相比有很高的表达,差异有统计学意义(P<0.05)。而在甲状腺癌中PADI4表达比健康血清低。在乳腺癌、肝细胞癌、肺癌、胃癌、结直肠癌、胰腺癌、卵巢癌和肾细胞癌等手术后患者血中PADI4表达明显下降。2.cAT在乳腺癌、肝细胞癌、肺癌、食管癌、胃癌、结直肠癌、胰腺癌、卵巢癌、膀胱癌、甲状腺癌和前列腺癌大多数恶性肿瘤中表达很高(P<0.05)。cAT在恶性肿瘤患者手术后表达下降。3.PADI4和cAT在肿瘤患者血液中表达的相关性通过χ2检验,在肝癌、肺癌、卵巢癌等肿瘤中PADI4表达和cAT的表达密切相关(P<0.01)。4.PADI4mRNA在卵巢癌组织中有表达,良性肿瘤病变组织中未检测到PADI4 mRNA的表达。5.PADI4mRNA在卵巢癌组织中的表达量为1.57×102copies/ml,良性肿瘤病变组织中未检测到PADI4mRNA的表达。6.PADI4蛋白在卵巢癌组织中显著表达,良性肿瘤病变组织中无表达或者微弱表达。结论 1.通过大量临床标本的检测,我们发现在肝癌、肺癌、卵巢癌、子宫癌中PADI4和瓜氨酸化抗凝血酶大量表达,并且二者表达密切相关,表明PAID4可能通过对抗凝血酶瓜氨酸化而参与了某些肿瘤的发病过程。2.通过RT-PCR和Taqman实时荧光定量RT-PCR方法检测了卵巢癌组织和卵巢良性肿瘤组织中PADI4mRNA的表达,发现在卵巢癌组织PADI4mRNA是高表达的,揭示了PADI4和卵巢癌之间的相关性。3.通过免疫组化方法检测了卵巢癌组织和卵巢良性肿瘤组织中PADI4蛋白的表达,发现在卵巢癌癌细胞中PADI4蛋白是显著表达的,表明PADI4在卵巢癌发病过程中发挥了重要作用。4.卵巢癌组织中PADI4在基因转录水平和蛋白翻译水平表达都是升高的,表明PADI4基因转录水平的异常可能导致其蛋白质表达异常,从而启动了了卵巢癌的发病过程。