【摘 要】
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将人可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅰ型(sTNFRI)基因插入黑曲霉(A. niger)融合蛋白基因的表达质粒pIGF中, 融合之处设计类胰蛋白酶(KEX2)加工位点, 构建融合表达载体pHBC. 以pHBC转
【机 构】
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将人可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅰ型(sTNFRI)基因插入黑曲霉(A. niger)融合蛋白基因的表达质粒pIGF中, 融合之处设计类胰蛋白酶(KEX2)加工位点, 构建融合表达载体pHBC. 以pHBC转化黑曲霉胞外蛋白酶缺失株A. niger 3.795-1-23, 通过Southern杂交鉴定阳性克隆. A. niger 3.795-1-23重组菌株的蛋白电泳显示有特异表达带, Western blotting证实该分泌蛋白具有sTNFRI的免疫活性.
The human soluble tumor necrosis factor receptor type I (sTNFRI) gene was inserted into the expression plasmid pIGF of the A. niger fusion protein gene, and the trypsin (KEX2) processing site was designed for the fusion site to construct the fusion expression vector pHBC. A. niger 3.795-1-23, an extracellular protease-deleted strain of A. niger, was transformed by pHBC and positive clones were identified by Southern hybridization. A. Niger 3.795-1-23 showed a specific expression band by electrophoresis of the recombinant strain. Western blotting confirmed this. Secreted proteins have sTNFRI immunoreactivity.
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