变形链球菌荧光报告株的构建和鉴定

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目的 探讨变形链球菌(S.mutans)荧光素酶(luc)基因报告株构建方法,拟为探讨抗菌剂对多菌种生物膜中S.mutans的作用提供研究基础.方法 将S.mutans UA159乳酸脱氢酶(ldh)基因及其上游部分约1 100 000片段克隆至自杀质粒pFW5-luc的多克隆位点,构建重组质粒,并经酶切和测序证实.采用自然转化的方法,实现重组自杀质粒和S.mutans UA159同源序列的单次交换.结果 经过聚合酶链反应(PCR)和测序分析,筛选出具有报告活性的S.mutans ldh-luc 基因荧光报告株.结论 成功构建了S.mutans ldh-luc基因荧光报告株.
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