水蜜桃E3泛素连接酶PpARI1基因的克隆及表达载体构建

来源 :上海大学学报:自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：love12355

【摘要】

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以新鲜水蜜桃为材料,根据NCBI中预测的桃E3泛素连接酶ARI1基因序列设计引物,通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)克隆该序列.利用双酶切定向连接的方法将PpAR

【作者】

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苑婕马方玮李梦云曹庆郑伟尉万嗣宝

【机构】

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上海大学生命科学学院上海市能源作物育种及应用重点实验室,浙江农业大学农业与食品科学学院浙江省农产品品质改良技术研究重点实验室

【出处】

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上海大学学报:自然科学版

【发表日期】

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2019年4期

【关键词】

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水蜜桃 E3泛素连接酶克隆表达载体构建 juicy peach E3 ubiquitin ligase cloning expression vector

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以新鲜水蜜桃为材料,根据NCBI中预测的桃E3泛素连接酶ARI1基因序列设计引物,通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)克隆该序列.利用双酶切定向连接的方法将PpARI1基因开放阅读框(open reading frame,ORF)正向重组到表达载体pCAMBIAy1300的XbaⅠ和BamHⅠ酶切位点之间,并用热激法转化到农杆菌感受态细胞中.成功克隆出的长度为1 764 bp的PpARI1基因CDS序列,与预测基因序列的一致性高达99.83%.对重组子测序结果表

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