探讨提取贮存骨髓涂片DNA的方法，通过对急性髓系白血病(AML)患者FMS样酪氨酸激酶3(FLT3)、NPM1及c-kit基因突变进行检测，分析三种基因突变与AML临床特征之间的关系。
方法收集55例AML患者骨髓涂片，采用聚合酶链反应(PCR)、DNA测序和分子克隆方法对FLT3-内部串联重复(ITD)、NPM1和c-kit基因突变进行检测及分析，记录患者疾病缓解、进展及生存时间。
结果实验证实对于低温冻存、未经瑞特染色、未用化学方法固定的骨髓涂片标本及室温贮存、经瑞特染色脱色后的标本均能用苯酚∶氯仿∶异戊醇法成功提取DNA。从骨髓涂片中提取的DNA可用于PCR、直接测序和分子克隆测序分析。在55例AML患者中，FLT3-ITD阳性10例(18.2%)，其中9例为杂合型突变，1例为纯合型突变。FLT3-ITD阳性组较阴性组完全缓解(CR)率低，无事件生存(EFS)和总生存(OS)时间短(P<0.05)。NPM1基因杂合型突变9例(16.4 %)，全部为A型突变。10个月以内NPM1突变组患者EFS率比野生组高(P<0.05)，19个月以内NPM1突变组OS率比野生组高(P<0.05)。9例NPM1突变患者中FLT3-ITD阳性3例，CR率由高到低依次为NPM1+ FLT3-ITD-、NPM1- FLT3-ITD-、NPM1- FLT3-ITD+、NPM1+ FLT3-ITD+(P<0.05)，且NPM1- FLT3-ITD+是影响OS的危险因素(RR=1.250, P=0.005)。55例患者中，c-kit基因突变2例(3.6 %)，分别为D816H突变型和D816V突变型；c-kit基因突变患者与FLT3-ITD阳性及NPM1突变患者无重叠。
结论FLT3-ITD突变为AML患者预后不良的分子标志，NPM1基因突变可能提示预后较好，NPM1- FLT3-ITD+是影响OS的危险因素。AML中c-kit基因突变率低，未见其与FLT3、NPM1基因突变重叠。