胰十二指肠切除术后胰瘘的预防

来源 :中华普通外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong419
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巨细胞病毒感染的血清学诊断方法是目前临床诊断中应用最广泛的方法之一。但由于缺少高效价、高纯度和高特异性的抗原,使各种血清学方法在其敏感性和特异性方面均不能令人满意。文献报道,通过分子生物学得到的或化学合成的单一病毒蛋白或部分成份可作为血清学诊断的良好抗原。本文报道用聚合酶链反应扩增了巨细胞病毒主要磷蛋白pPUL32的一个强抗原决定簇基因,并同时在扩增产物的两端引入了相应的限制性内切酶识别位点序列,
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研究资料表明,人巨细胞病毒(HCMV)单一蛋白的单一抗原决定簇只能被部分患者阳性血清识别。组建在血清学诊断中能够替代全病毒抗原的基因工程抗原,需要含有病毒多种主要抗原蛋白的抗原决定簇。为搞清在表达载体中重复插入某一抗原决定簇基因是否能表达出更高抗原效价的融合蛋白,我们用点突变的方法,在表达载体中分别插入了人HCMV的ppUL32蛋白羧基端一个抗原决定簇基因的1个、2个和3个拷贝。在免疫转印检测中,
作者以14份早期钩体病人血清进行聚合酶链反应(PCR),并以地高辛-硷性磷酸酶发光体(Dig-AMPPD)同源探针行分子杂交,全部血清样品均获得阳性结果。此法敏感、特异、易行,可明显提高钩体病诊断水平。以扩增的基因片段与16株Yasuda基因组钩体DNA限制性谱行Southern印迹分析,与其中6株存在同源单拷贝序列,它们皆为我国主要流行和致病的优势菌型。用电脑核苷酸测定仪分析该基因的核苷酸序列、
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