重组人干细胞因子-血小板生成素融合蛋白的表达及活性初步研究

来源 :中华血液学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sjtulzhff
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读

目的 研究重组人干细胞因子-血小板生成素(SCF-TPO)融合蛋白表达的最佳条件及其生物学活性.方法设计引物,利用RT-PCR从胎肝细胞中扩增到SCF和TPO氨基端功能区片段,采用基因融合新策略将其融合成SCF-TPO融合基因,克隆到pGEM-T载体中,构建pET32a/SCF-TPO融合基因原核表达载体,在宿主菌E.coliBL21(DE3)plysS中经异丙基-β-D-硫代半乳糖(IPTG)诱导其高表达SCF-TPO,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blot检测.目的蛋白经包涵体变性,金属螯合层析纯化,透析复性,用细胞因子依赖细胞系MO7e进行细胞增殖实验.结果获得SCF-TPO融合基因的高表达,表达量占菌体总蛋白的30%以上.Western blot法鉴定表达正确,MTT法证明该融合蛋白具有细胞增殖活性,浓度为100ng/ml时刺激活性更强.结论表达并复性后的重组人SCF-TPO融合蛋白具有刺激MO7e细胞生长活性。

其他文献
对两种不同级别的深冲钢冷轧薄板进行了高速压平缝焊焊接试验。试验考察了不同焊接工艺参数、热处理状态下接头的组织性能及高、中温力学行为。结果表明,接头焊态组织可分母材
音乐家逝世(二月)美国(波兰)钢琴家霍夫曼(Josef Hofmann)2月16日逝世于洛杉矶。他六岁公开演奏,九岁在欧洲各地演出,1887年在美国初次登台。1892- 1894年师从安东·鲁宾斯坦
税政档案是税务档案的重要组成部分,具体指税收政策管理部门在工作中,直接形成的有保存价值的各种文字、图表、声像等不同形式的历史纪录。按内容分主要包括:税收政策文件,税
近日,北京市卫生局公布消息,将扩大试点财政支付额度,全额补贴公立医院亏损,以缓解“看病贵”。享受财政全额补贴的医院以公立医院为主,须在政府主导下核算各项医疗成本,同时
筒形件强力旋压是公认的制造大型薄壁筒形件的有效方法之一,目前已广泛应用于实际生产中.强力旋压技术由于其自身工艺的复杂性,给理论上的精确分析带来诸多不便.近年来,塑性
近期,我们成功地开发了新纳米晶Fe_(72)Cu_1Nb_2Si_(14)B_9和Fe_(72)Cu_1Nb_1Mo_1V_2Si_(14)B_9合金,和早期问世的典型的纳米晶 Fe_(73.5)Cu_1Nb_3Si_(13.5)B_9和Fe_(73.1)Cu
新疆今年已经全部取消农业税, 使农村税费改革进入一个新阶段。充分认识目前新疆农村税费改革的现状及面临的深层次的困难和问题,进而采取有效措施,进一步深化改革和促进农民
在进入到法拉盛之后,如果你发现不幸把手机、平板电脑这些手持设备忘记在家里了,那绝对不会是一个错误,你会得到补偿,一面50英尺长,8英尺高的数码墙在提供着FACEBOOK、微博、彭博社和官网关于美网的一切。它是未来之境,就和那个尚未开始的庞大扩建计划一样,朝着未来飞速地掘进着美网的空间,尽管这是一个虚拟的空间,它的魅力不会比真实的空间更少。  纽约每刻都在变身,都在设法让拥挤在一起的人群不感到厌倦,
随着互联网金融的不断发展,股权众筹作为其发展模式之一,能够解决中小企业融资困难等问题,具有融资效率高且门槛低等优点,故其影响力不断扩大.然而我国的股权众筹制度尚在初
目的 观察白念珠菌对人血管内皮细胞表面细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)表达及分泌白介素6(IL-6)、白介素8(IL-8)水平的影响.方法分离健康产妇胎盘脐静脉内皮细胞进行原代培养,细胞长至单层时,与白念珠菌共培养不同时间,再用逆转录-聚合酶链反应法分析内皮细胞表面ICAM-1 mRNA、VCAM-1 mRNA的表达,用ELISA法检测IL-6、IL-8分泌