探讨干扰烟酰胺单核苷酸转移酶1(NMNAT1)基因表达在帕金森病小鼠模型中的作用及其机制。
方法将C57BL/6种系小鼠30只按随机数字表法随机分为1－甲基－4－苯基－1，2，3，6－四氢吡啶(MPTP)组、干扰NMNAT1表达(siNMNAT1＋MPTP)组和对照组，每组10只。siNMNAT1＋MPTP组小鼠黑质注射由连接绿色荧光蛋白(GFP)的小干扰RNA(siRNA－GFP)构成的腺病毒，MPTP组及对照组注射等量GFP构成的腺病毒，然后siNMNAT1＋MPTP组与MPTP组小鼠腹腔注射MPTP来构建慢性帕金森病小鼠模型，对照组腹腔注射等量生理盐水。评估小鼠的运动协调能力，采用免疫荧光染色法测定黑质多巴胺能神经元数目，采用RT－PCR评估纹状体酪氨酸羟化酶(TH)表达水平，采用Western印迹法检测黑质中TH、超氧化物歧化酶1(SOD1)、B淋巴细胞瘤－2(Bcl2)蛋白和Bcl2相关X(Bax)蛋白的表达。
结果与对照组相比，siNMNAT1＋MPTP组、MPTP组的运动协调能力[滚轴实验滑落时间：siNMNAT1＋MPTP组(62.8±15.7)s，MPTP组(77.9±13.5)s，对照组(122.0±25.2)s]、多巴胺能神经元计数(siNMNAT1＋MPTP组45.0±6.7，MPTP组68.0±11.3，对照组93.0±12.8)及纹状体TH表达水平均降低且差异具有统计学意义(滚轴实验滑落时间：t＝－6.291, P＝0.000；t＝－4.865, P＝0.000。多巴胺能神经元计数：t＝－10.482，P＝0.000；t＝－4.624，P＝0.000。TH表达水平：t＝－9.117，P＝0.000；t＝－5.716，P＝0.000)。与MPTP组相比，siNMNAT1＋MPTP组小鼠的协调运动能力降低，但差异无统计学意义，而多巴胺能神经元计数及纹状体TH表达均明显减少(t＝－5.487，P＝0.000；t＝－5.146，P＝0.003)，黑质中SOD1表达水平(t＝－4.143，P＝0.001)、Bcl2/Bax比值均明显降低(t＝－6.303，P＝0.000)，Bax蛋白表达水平明显升高(t＝3.550，P＝0.002)。
结论干扰帕金森病小鼠模型NMANT1表达可通过影响细胞凋亡、氧化应激促进多巴胺能神经元的丢失，降低小鼠的运动协调能力。