【摘 要】
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目的探讨端粒酶催化亚单位(hTRT)基因反义寡核苷酸(ASODN)对前列腺癌细胞的诱导凋亡作用.方法合成针对hTRT的28mer ASODN,转染前列腺癌细胞12～36 h后,细胞计数、透射电镜、DNA Ladder、原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测癌细咆凋亡;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、聚合酶链反应-酶联免疫吸附试验(PCR-ELISA)技术检测hTRT基因表达和端粒酶活性.结
【机 构】
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430022,武汉,华中科技大学同济医学院附属协和医院泌尿外科,430022,武汉,华中科技大学同济医学院附属协和医院病理科,
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目的探讨端粒酶催化亚单位(hTRT)基因反义寡核苷酸(ASODN)对前列腺癌细胞的诱导凋亡作用.方法合成针对hTRT的28mer ASODN,转染前列腺癌细胞12～36 h后,细胞计数、透射电镜、DNA Ladder、原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测癌细咆凋亡;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、聚合酶链反应-酶联免疫吸附试验(PCR-ELISA)技术检测hTRT基因表达和端粒酶活性.结果0.5～2.0μmol/L ASODN转染后,癌细胞体外生长抑制16.08%～53.41%(P＜0.05),部分癌细胞呈现凋亡形态学改变和DNA片段化,凋亡率为9.36%～37.54%(P＜0.05),hTRT表达减弱24.48%～86.73%(P＜0.01),端粒酶活性降低24.74%～76.72%(P＜0.01).结论运用ASODN阻断端粒酶hTRT基因表达,能降低端粒酶活性,显著诱导前列腺癌细胞凋亡.
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