论文部分内容阅读
目的
探讨肝癌HepG2细胞来源外泌体是否通过环磷酸腺苷(cAMP)反应元件结合蛋白/叉状头/翅膀状螺旋转录因子3 (CREB/Foxp3)途径调控调节性T细胞(Treg细胞)。
方法超速离心法分离外泌体(Exsomes)；透射电镜及Western blot对外泌体进行鉴定；将HepG2和L02细胞来源外泌体分别与人外周血单个核细胞共培养，流式细胞检测Treg细胞比例的变化，Western blot检测CREB/Foxp3信号蛋白的表达。
结果见外泌体直径约30～100 nm，呈圆形或椭圆形的囊泡状结构，且富含CD81和CD63蛋白。与L02-exo组[(1.87±0.18)%]和空白对照组[(1.43±0.12)%]比较，HepG2-exo组[(6.87±0.87)%]Treg细胞的比例显著上调，P值分别为0.005和0.004。HepG2-exo组CREB磷酸化分别是对照组和L02-exo组的1.74倍和1.63倍，P值均为0.001；HepG2-exo组Foxp3磷酸化分别是对照组和L02-exo组的1.93倍和1.78倍，P值均为0.001。
结论肝癌细胞HepG2来源的外泌体可能通过CREB/Foxp3信号上调Treg细胞比例参与肿瘤免疫逃逸。