【摘 要】
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目的 探讨川芎中3个苯酞类成分藁本内酯、洋川芎内酯A和洋川芎内酯Ⅰ对氧糖剥夺/再灌注诱导MDR1转染犬肾细胞(MDCK-MDR1)损伤的作用及机制.方法 采用氧糖剥夺/再灌注诱导MDCK
【机 构】
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江西中医药大学现代中药制剂教育部重点实验室,创新药物与高效节能降耗制药设备国家重点实验室,江西南昌330004
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目的 探讨川芎中3个苯酞类成分藁本内酯、洋川芎内酯A和洋川芎内酯Ⅰ对氧糖剥夺/再灌注诱导MDR1转染犬肾细胞(MDCK-MDR1)损伤的作用及机制.方法 采用氧糖剥夺/再灌注诱导MDCK-MDR1细胞损伤模型,给予藁本内酯、洋川芎内酯A和洋川芎内酯Ⅰ进行干预,采用MTT法检测细胞存活率;采用试剂盒检测细胞上清液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放率;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;采用Western blotting法检测细胞紧密连接蛋白如claudin-5、occludin、ZO-1 以及外排蛋白 P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)和葡萄糖转运蛋白-1(glucose transporter-1,GLUT-1)表达情况;以芍药苷为探针药物,研究藁本内酯、洋川芎内酯A和洋川芎内酯Ⅰ对芍药苷在氧糖剥夺/再灌注诱导的MDCK-MDR1细胞上跨膜转运的影响.结果 与模型组比较,洋川芎内酯Ⅰ(80μg/mL)显著提高MDCK-MDR1细胞存活率(P＜0.05);洋川芎内酯Ⅰ(40、80 μg/mL)显著抑制细胞上清液中LDH释放率(P＜0.05、0.01);藁本内酯(20、40μg/mL)和洋川芎内酯Ⅰ显著抑制细胞凋亡率(P＜0.01);藁本内酯(20μg/mL)和洋川芎内酯Ⅰ显著上调claudin-5蛋白表达水平(P＜0.05、0.01);藁本内酯(20、40μg/mL)、洋川芎内酯A(20 μg/mL)和洋川芎内酯Ⅰ(40、80 μg/mL)显著上调occludin蛋白表达水平(P＜0.01);藁本内酯(20μg/mL)和洋川芎内酯Ⅰ(40μg/mL)显著上调ZO-1蛋白表达水平(P＜0.05、0.01);藁本内酯、洋川芎内酯A(40、80μg/mL)和洋川芎内酯Ⅰ显著下调GLUT-1蛋白表达水平(P＜0.01);藁本内酯(20μg/mL)、洋川芎内酯A和洋川芎内酯Ⅰ(20μg/mL)显著下调P-gp蛋白表达水平(P＜0.01);藁本内酯(20 μg/mL)、洋川芎内酯A(40、80 μg/mL)和洋川芎内酯Ⅰ显著促进芍药苷跨膜转运(P＜0.05、0.01).结论 藁本内酯、洋川芎内酯A和洋川芎内酯Ⅰ能够上调紧密连接蛋白表达,抑制氧糖剥夺/再灌注诱导的MDCK-MDR1细胞损伤,促进探针药物的跨膜转运.
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