【摘 要】
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目的:探讨组织因子途径抑制物2(TFPI-2)对心房成纤维细胞和心房肌细胞功能的影响及相关分子机制。方法:采用ELISA法检测15例心房颤动(AF)患者和15名正常对照血清TFPI-2水平。分离、培养并鉴定SD乳鼠心房成纤维细胞和心房肌细胞。通过CCK-8实验检测0、50、100、200μg/L重组TFPI-2蛋白(rTFPI-2)处理24、48 h对心房成纤维细胞增殖能力的影响。采用Transw
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(81702465,U1804172); 中国博士后科学基金项目(2019M652591); 河南省自然科学基金项目(212300410257);
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目的:探讨组织因子途径抑制物2(TFPI-2)对心房成纤维细胞和心房肌细胞功能的影响及相关分子机制。方法:采用ELISA法检测15例心房颤动(AF)患者和15名正常对照血清TFPI-2水平。分离、培养并鉴定SD乳鼠心房成纤维细胞和心房肌细胞。通过CCK-8实验检测0、50、100、200μg/L重组TFPI-2蛋白(rTFPI-2)处理24、48 h对心房成纤维细胞增殖能力的影响。采用Transwell小室实验检测100μg/L rTFPI-2处理24 h对心房成纤维细胞迁移能力的影响,采用Annexin V-FITC/PI双染法检测rTFPI-2处理48 h对心房成纤维细胞和心房肌细胞凋亡的影响,采用Western blot法检测细胞中相关蛋白的表达。结果:AF患者血清TFPI-2水平低于正常对照(P<0.05)。成功分离、培养SD乳鼠心房成纤维细胞和心房肌细胞并鉴定。rTFPI-2可抑制心房成纤维细胞增殖、迁移,并促进其凋亡(P<0.05),但rTFPI-2不增加心房肌细胞凋亡(P>0.05)。rTFPI-2下调心房成纤维细胞p-Erk1/2及MMP-9和MMP-2表达,上调PARP表达(P<0.05),但对心房肌细胞PARP表达无显著影响(P>0.05);rTFPI-2抑制两种细胞Ⅲ型、Ⅰ型胶原表达(P<0.05)。结论:TFPI-2可抑制心房成纤维细胞增殖和迁移,促进心房成纤维细胞凋亡,但不增加心房肌细胞凋亡,TFPI-2能抑制两种细胞胶原合成;TFPI-2具有抑制心房纤维化的潜在价值。
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