【摘 要】
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目的 观察地氟烷后处理的脑缺血再灌注(ischemia reperfusion,IR)损伤小鼠神经行为学及脑组织病理变化,探讨JAK2/STAT3通路在其中的作用.方法 SPF级雄性BALB/c小鼠50只,随机分为IR组、IR+地氟烷组、IR+JAK2抑制剂组、IR+地氟烷+JAK2抑制剂组和假手术组各10只.IR组采用线栓法阻塞大脑中动脉60 min后恢复灌注,制备IR模型;IR+地氟烷组制备IR模型后吸入体积分数8％地氟烷60 min;IR+JAK2抑制剂组在大脑中动脉阻塞前即刻腹腔注射JAK2抑制剂
【机 构】
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首都医科大学附属北京同仁医院麻醉科,北京 100730;首都医科大学附属北京口腔医院麻醉科,北京 100050
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目的 观察地氟烷后处理的脑缺血再灌注(ischemia reperfusion,IR)损伤小鼠神经行为学及脑组织病理变化,探讨JAK2/STAT3通路在其中的作用.方法 SPF级雄性BALB/c小鼠50只,随机分为IR组、IR+地氟烷组、IR+JAK2抑制剂组、IR+地氟烷+JAK2抑制剂组和假手术组各10只.IR组采用线栓法阻塞大脑中动脉60 min后恢复灌注,制备IR模型;IR+地氟烷组制备IR模型后吸入体积分数8％地氟烷60 min;IR+JAK2抑制剂组在大脑中动脉阻塞前即刻腹腔注射JAK2抑制剂AG49040 mg/kg,余操作同IR组;IR+地氟烷+JAK2抑制剂组在大脑中动脉阻塞前即刻腹腔注射AG49040mg/kg,缺血处理60 min后恢复灌注,吸入体积分数8％地氟烷60 min;假手术组只进行手术操作,不阻塞大脑中动脉,不吸入地氟烷,不腹腔注射AG490.再灌注24 h后,比较5组小鼠神经行为学评分;然后处死小鼠,取脑组织缺血半影区,行TUNEL染色并计算凋亡细胞数,采用Western blot法检测脑组织JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3、Bcl-2、Bax蛋白相对表达量并计算p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3.结果 IR组[(6.83±0.74)分]、IR+地氟烷组[(4.21±0.52)分]、IR+JAK2抑制剂组[(7.90±1.03)分]、IR+地氟烷+JAK2抑制剂组[(5.02±0.54)分]神经行为学评分均高于假手术组(0分)(P＜0.05);IR+地氟烷组神经行为学评分低于IR组(P＜0.05);IR+JAK2抑制剂组神经行为学评分高于IR组(P＜0.05);IR+地氟烷+JAK2抑制剂组神经行为学评分低于IR+JAK2抑制剂组(P＜0.05).IR组[(48.52±4.36)个]、IR+地氟烷组[(23.04±3.35)个]、IR+JAK2抑制剂组[(59.00±6.14)个]、IR+地氟烷+JAK2抑制剂组[(35.63±4.28)个]脑组织缺血半影区凋亡细胞数均多于假手术组[(5.00±1.00)个](P＜0.05);IR+地氟烷组脑组织缺血半影区凋亡细胞数少于IR组(P＜0.05);IR+JAK2抑制剂组脑组织缺血半影区凋亡细胞数多于IR组(P＜0.05);IR+地氟烷+JAK2抑制剂组脑组织缺血半影区凋亡细胞数少于IR+JAK2抑制剂组(P＜0.05).IR组、IR+地氟烷组、IR+ JAK2抑制剂组、IR+地氟烷+JAK2抑制剂组脑组织p-JAK2/JAK2(0.59±0.06、0.70±0.08、0.21±0.02、0.36±0.09)、p-STAT3/STAT3 (0.56±0.05、0.72±0.07、0.24±0.03、0.35±0.04)及Bcl-2(0.43±0.05、0.65±0.07、0.26±0.03、0.39±0.06)、Bax(0.83±0.09、0.58土0.06、0.89±0.10、0.76±0.08)蛋白相对表达量均高于假手术组(0.10±0.02、0.13±0.01、0.18±0.03、0.14±0.02)(P＜0.05);IR+地氟烷组脑组织p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3及Bcl-2蛋白相对表达量均高于IR组(P＜0.05),Bax蛋白相对表达量低于IR组(P＜0.05);IR+JAK2抑制剂组脑组织p JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3及Bcl-2蛋白相对表达量均低于IR组(P＜0.05),Bax蛋白相对表达量与IR组比较差异无统计学意义(P＞0.05);IR+地氟烷+JAK2抑制剂组脑组织p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3及Bcl-2蛋白相对表达量均高于IR+JAK2抑制剂组(P＜0.05),Bax蛋白相对表达量低于IR+JAK2抑制剂组(P＜0.05).结论 地氟烷后处理可激活JAK2/STAT3通路,增加脑组织Bcl-2表达,减少Bax表达,抑制脑IR损伤小鼠脑细胞凋亡,发挥神经保护作用.
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