pig7基因在急性白血病细胞中的表达及其临床意义

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目的 检测pig7基因在急性白血病(AL)细胞中的表达水平及其临床意义,在基因甲基化调控方面探讨pig7基因表达异常的可能机制.方法 应用实时定量逆转录PCR(RT-PCR)方法对138例AL患者、21名正常人骨髓标本以及6个白血病细胞株进行了pig7转录本的检测,并在全反式维甲酸(ATRA)作用下观察NB4细胞分化效应及pig7基因表达情况.进行限制性内切酶分析以鉴定白血病细胞中存在的pig7转录剪接体.通过甲基化特异性PCR(MSP)检测白血病细胞pig7基因启动子区域是否存在过度甲基化.结果 AL进展期(包括初治、复发/难治)患者骨髓细胞pig7 mRNA相对表达水平与正常骨髓细胞相比明显降低(RQ中位数分别为0.62和18.30,P<0.01),其中急性髓系白血病(AML)与急性淋巴细胞白血病(ALL)差异无统计学意义,而初治组与复发/难治组比较pig7 mRNA水平差异有统计学意义,前者明显高于后者(RQ中位数分别为1.43和0.16,P<0.05).pig7低表达患者完全缓解率也较低(P<0.05).NB4细胞经ATRA诱导分化后pig7表达水平由1.61±0.72增至44.75±3.93(P<0.01).酶切结果提示白血病细胞中仅存在SIMPLE剪接体.在K562、HL-60及Nalm-6细胞pig7启动子区域存在过度甲基化,而U937、NB4和kasumi-1细胞中该区域非甲基化状态占优势.结论 pig7基因在AL的表达下调为白血病发病机制的探讨和疗效预测提供了新的思路。

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