【摘 要】
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目的 探究敲低WD重复结构域12(WDR12)对小鼠精原细胞(GC-1)的影响.方法 利用脂质体转染法将针对WDR12的shRNA编码克隆(shWDR12)及阴性对照的EGFP质粒转染细胞后,Western blot和Q-PCR检测细胞中WDR12表达量;CCK-8试剂盒检测细胞增殖情况;TUNEL试剂盒染色检测细胞凋亡情况;Q-PCR检测细胞中核糖体蛋白基因的差异表达.结果 与转染阴性对照质粒的细胞相比,转染shWDR12的细胞检测结果显示成功降低了GC-1细胞中WDR12的表达(P<0.01);WDR
【机 构】
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安徽医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,合肥 230032
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目的 探究敲低WD重复结构域12(WDR12)对小鼠精原细胞(GC-1)的影响.方法 利用脂质体转染法将针对WDR12的shRNA编码克隆(shWDR12)及阴性对照的EGFP质粒转染细胞后,Western blot和Q-PCR检测细胞中WDR12表达量;CCK-8试剂盒检测细胞增殖情况;TUNEL试剂盒染色检测细胞凋亡情况;Q-PCR检测细胞中核糖体蛋白基因的差异表达.结果 与转染阴性对照质粒的细胞相比,转染shWDR12的细胞检测结果显示成功降低了GC-1细胞中WDR12的表达(P<0.01);WDR12敲低的GC-1细胞增殖被抑制;TUNEL染色结果显示WDR12敲低后凋亡细胞数量增多;转染shWDR12后细胞内核糖体相关蛋白基因[核糖体蛋白S3(RPS3)(P<0.05)、核糖体蛋白L11(RPL11)(P<0.01)、核糖体蛋白S15(RPS15)(P0.05)]的表达量下降.结论 转染shWDR12能有效敲低GC-1细胞中WDR12的表达,WDR12表达的降低导致GC-1细胞出现增殖能力下降、凋亡数量增多及核糖体相关蛋白基因表达下调.
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