【摘 要】
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为同时快速筛查猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)、猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)以及猪圆环病毒2型(Porcine circ
【机 构】
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北京海关技术中心 北京100026;北京农学院 北京102206
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为同时快速筛查猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)、猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)以及猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)3种可致猪腹泻的猪病病原,本研究基于微芯片技术,针对3种病毒特异性基因分别建立微量实时荧光(RT-)PCR检测体系,并将其组合在微芯片上.结果 显示,该方法可特异性检出以上3种病毒核酸,但不能检出本实验室保存的其他5种猪病病毒核酸,而且相互之间无交叉反应;灵敏度试验显示TGEV和PEDV检测灵敏度均可达到1TCID50/0.1 mL,对于含PCV2全基因组质粒,检测极限为41fg/μL.对237份送检样品的检测结果显示,PEDV和PCV2检出率分别为0.8％和7.2％,但未检出TGEV,与常规管式荧光(RT-)PCR检测结果一致.该项技术可大大降低筛查的试剂成本,因为每个反应池只需要1.2 μL的(RT-) PCR试剂混合物,而且比传统的实时(RT-)PCR系统的热平衡和热均匀性更快.本研究表明该技术可用于猪相关疫病的快速检测和筛查.
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