小鼠内皮抑制素原核表达质粒的构建及表达

来源 :华中科技大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhizu81748
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内皮抑制素具有强烈的抑制新生血管形成的作用,其主要在肝脏合成.提取小鼠肝细胞总RNA,设计合适的引物,用RT-PCR扩增出小鼠内皮抑制素cDNA片段,插入原核表达载体pRSET-A中,构建出重组质粒pRSET-ES.将其转化人大肠杆菌DH5α中扩增,质粒酶切筛选,DNA测序予以证实.重组质粒转化人大肠杆菌BDPS中,经IPTG诱导,SDS-PAGE检测到约19.8 ku大小的融合蛋白.
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