【摘 要】
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目的 探讨富半胱氨酸61(CCN1)降低结肠癌细胞对5-氟尿嘧啶(5-FU)化疗敏感性的作用及其分子机制.方法 收集结肠癌及癌旁组织,体外培养结肠癌细胞和正常结肠上皮细胞、HCT-116
【机 构】
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河南省驻马店市中心医院药学部 463000;河南省人民医院 河南省神经疾病影像诊断与研究重点实验室,郑州450003;江苏省人民医院 南京医科大学第一附属医院病理学部 210000;江苏省人民医院 南
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目的 探讨富半胱氨酸61(CCN1)降低结肠癌细胞对5-氟尿嘧啶(5-FU)化疗敏感性的作用及其分子机制.方法 收集结肠癌及癌旁组织,体外培养结肠癌细胞和正常结肠上皮细胞、HCT-116细胞和5-FU耐药细胞,RT-qPCR检测SCD1和CCN1 mRNA的表达水平;培养HCT-116细胞,分别转染pcDNA3.1和CCN1表达载体,或感染shCtrl和shCCNl慢病毒,加入5-FU后用CCK-8方法检测细胞活力,Western blot和RT-qPCR检测SCD1蛋白和mRNA表达水平,油红O染色方法检测细胞脂质含量;Western blot检测转录因子FoxO1在细胞核和细胞质中的分布情况,荧光素酶报告基因检测CCN1和FoxO1对SCD1启动子转录活性的影响.结果 与对照组相比,结肠癌组织、细胞系及HCT-116/5-FU细胞中SCD1的表达水平均上调(均P ＜ 0.05);过表达CCN1能够降低细胞对5-FU的敏感性,增加细胞内脂质沉积,上调SCD1的表达水平(P＜0.05);敲降CCN1则显著增加细胞对5-FU的敏感性,降低细胞内脂质含量,下调SCD1的表达水平(P＜0.05);CCN1能够促进FoxO1出核,激活或抑制FoxO1活性能够促进或下调SCD1的表达水平和启动子活性(P＜0.05).结论 CCN1可能通过激活FoxO1活性上调SCD1的表达从而抑制结肠癌细胞对5-FU的敏感性.
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