【摘 要】
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嗜冷黄杆菌(Flavobacterium psychrophilum)是鲑鳟类细菌性冷水病(bacterial cold water disease,BCWD)的病原菌,该病的发生和流行严重制约了鲑鳟产业的健康发展.本研究分析嗜冷黄杆菌肌肉注射感染虹鳟(Oncorhynchus mykiss)后病原菌的动态组织分布情况,以期为BCWD的防控提供理论支撑.以1.0× 108 CFU/mL浓度的嗜冷黄杆菌CH06株菌液肌肉注射感染实验虹鳟,感染后12h、24 h、96 h观察虹鳟临床症状及组织病变,并利用qP
【机 构】
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中国水产科学研究院黑龙江水产研究所,黑龙江哈尔滨150070;黑龙江省水生动物病害与免疫重点实验室,黑龙江哈尔滨150070;上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心,上海201306;中国水产科学
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嗜冷黄杆菌(Flavobacterium psychrophilum)是鲑鳟类细菌性冷水病(bacterial cold water disease,BCWD)的病原菌,该病的发生和流行严重制约了鲑鳟产业的健康发展.本研究分析嗜冷黄杆菌肌肉注射感染虹鳟(Oncorhynchus mykiss)后病原菌的动态组织分布情况,以期为BCWD的防控提供理论支撑.以1.0× 108 CFU/mL浓度的嗜冷黄杆菌CH06株菌液肌肉注射感染实验虹鳟,感染后12h、24 h、96 h观察虹鳟临床症状及组织病变,并利用qPCR Taqman探针法检测各组织病原载量.患病鱼的临床病征表现为体色发黑、游动缓慢或不动、食欲不振,尾柄部注射处肌肉溃烂,鳃苍白,脾脏肿大,伴有腹水.组织病理观察显示,嗜冷黄杆菌感染后实验鱼注射处肌纤维断裂、溶解;脾窦扩张,其内充满红细胞;肾脏组织含铁血黄素增加,出现大量空泡变性,肾小管上皮细胞变性、坏死,肾间质炎性细胞浸润.qPCR检测结果表明,肌肉注射感染12 h后即可在脾脏、肝脏、肾脏、肠道、鳃、注射处肌肉、脑和尾鳍中检出嗜冷黄杆菌,注射处肌肉病原载量最高为(5.85±2.11)×105 copy/μL.感染后24 h,脾脏、脑中病原载量较12h时上升最多,其他组织病原载量与感染12h时水平一致,注射处肌肉病原载量为(6.48±2.07)× 105 copy/μL,显著高于其他组织(P＜0.05).感染96 h后脾脏中的病原载量显著高于其他组织(P＜0.05),达到(1.15+0.58)×107 copy/μL;肝脏、肾脏、脾脏中的病原载量较24 h时上升最多.所有被检组织中病原菌载量随时间延长均呈上升趋势.另外,3个时间点注射处肌肉的病原平均载量最高,其次为脾脏,然后是肾脏和鳃.嗜冷黄杆菌人工感染虹鳟后,注射处肌肉、脾脏是细菌的重要增殖场所.综上,嗜冷黄杆菌可随着血液循环进入虹鳟各组织,并表现出对注射处肌肉、脾脏、肾脏和鳃较强的组织嗜性,而对肝脏、尾鳍、肠道和脑组织的嗜性相对较弱:感染时间和病变程度与组织中的病原载量呈正相关.
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