【摘 要】
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目的克隆和鉴定CaMKⅡα基因启动子序列,构建神经细胞特异性Cre重组酶的真核表达载体。方法采用高保真PCR方法分步扩增CaMKⅡα基因5′端8.1kb的调控区DNA片段,该片段包括了C
【机 构】
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福建医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学系
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目的克隆和鉴定CaMKⅡα基因启动子序列,构建神经细胞特异性Cre重组酶的真核表达载体。方法采用高保真PCR方法分步扩增CaMKⅡα基因5′端8.1kb的调控区DNA片段,该片段包括了CaMKⅡα基因5′端调控区的所有序列。经克隆和部分序列测定后,依次与pCre-IRES-EGFP质粒框架连接,构建载体。结果克隆的CaMKⅡα基因5′端侧翼区酶切图谱与公布的C57BL/6J小鼠相应序列的酶切位点相一致,其中文献报道的富含顺式调控元件的序列与公布的小鼠序列完全相同。CaMKⅡα基因启动子正确地连接于Cre基因的5′端,构建了目标载体。结论这一载体的构建为建立前脑神经细胞特异性表达Cre重组酶的转基因小鼠奠定了基础,有助于神经系统相关疾病的研究。
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