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针对生化反应器应用条件，提出了用于生化反应器的在线细胞观察仪的基本技术要求。在比较了国内外现有的细胞在线显微工作原理后，研制了一种基于暗视场的新的显微细胞观察仪，介绍了其关键技术及结构。另外，原位在线显微细胞观察仪应用于酿酒酵母和哺乳动物细胞HEK293细胞的培养试验，在线细胞计数结果与离线细胞计数和细胞干重相比较，均有很好的相关性，表明此仪器基本满足使用要求。