评价本实验室构建的人偏肺病毒多表位抗原(MEA)的免疫应答水平。
方法4～6周龄雌性SPF级BALB/c小鼠分为7组：MEA＋含CpG基序的寡聚脱氧核苷酸(oligodeoxynucleotides containing CpG motifs，CpG ODN)腹腔注射组i.p.，MEA＋Alum腹腔注射组i.p.，MEA＋Alum＋CpG ODN腹腔注射组i.p.，MEA＋CpG ODN滴鼻组i.n.，MEA＋Alum＋CpG ODN滴鼻组i.n.，以上5组分别于0 d、14 d、21 d免疫3次；MEA＋Quickantibody5W肌肉注射组i.m.，分别于0 d、21 d免疫2次，同时设未处理对照组，末次免疫后2周杀鼠进行相应检测。采用ELISA法检测血清IgG、IgG1、IgG2a和IgA抗体，MTS法进行淋巴细胞增殖试验，LDH法检测杀伤性T淋巴细胞杀伤活性，流式细胞仪检测CD4＋/CD8＋ T细胞，悬浮芯片法检测脾细胞分泌细胞因子。
结果MEA免疫后除滴鼻免疫组外，其他组均产生了高滴度IgG抗体，抗体效价均>104。除滴鼻免疫组外，其余各组IgG1与IgG2a抗体均显著存在。3组免疫动物血清中检测到了IgA，其中MEA＋Alum＋CpG ODN i．p.组IgA效价最高为2.15×103。与对照组相比，MEA＋Alum i．p.、MEA＋Alum＋CpG ODN i．p.和MEA＋Quickantibody5W i．m.淋巴细胞增殖指数有明显增高(P<0.05)。腹腔免疫组及MEA＋Quickantibody5W肌肉免疫组CTL杀伤活性均明显增强(P<0.05)。MEA＋CpG ODN i．p组Th1型细胞因子均分泌增多，其中IL-2和IFN-γ增幅最明显，3种Th2型细胞因子分泌均明显增多。MEA＋Alum i．p.组IFN-γ稍有增加，IL-4、IL-5、IL-10均明显增加，MEA＋Alum＋CpG ODN i．p.组IFN-γ增幅最明显，IL-4、IL-5、IL-10均明显增加。MEA＋Quickantibody5W i．m组IFN-γ增幅最明显，IL-5、IL-10明显增加，GM-CSF也明显增加。除滴鼻免疫组外，其余各组脾细胞中CD4＋/CD8＋ T细胞稍有增加(P<0.05)。
结论MEA在不同佐剂作用下可产生高滴度的特异性抗体，也可激活CTL。CpG ODN可引起Th1/Th2平衡免疫应答，CpG ODN和铝镁佐剂合用免疫效果最好，商品化佐剂Quickantibody5W也可产生相似的效果。本研究为今后hMPV表位疫苗开发、诊断方法建立及hMPV流行病学研究等奠定了基础。