【摘 要】
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目的 建立一种快速、简便的抗核抗体(ANA)检测方法.方法 采用快速斑点酶标法(Rapid-Dot-ELISA,R-Dot-ELISA)检测20份ANA阳性系统性红斑狼疮(SLE)患者血清和20份阴性正常健康
【机 构】
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徐州医学院人体解剖学教研室,安徽徐州,221004;徐州医学院病原生物学与免疫学教研室,安徽徐州,221004
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目的 建立一种快速、简便的抗核抗体(ANA)检测方法.方法 采用快速斑点酶标法(Rapid-Dot-ELISA,R-Dot-ELISA)检测20份ANA阳性系统性红斑狼疮(SLE)患者血清和20份阴性正常健康者血清的ANA.检测中采用不同浓度的核抗原、不同的封闭液、不同浓度的酶标抗体、不同显色时间,摸索最佳检测条件.确定检测条件后,采用R-Dot-ELISA法、ELISA法和免疫荧光法检测190例系统性自身免疫性疾病患者和50例健康者血清的ANA,比较R-Dot-ELISA法与ELISA法和免疫荧光法检测的一致性.结果 核抗原浓度为40～ 160mg/L、封闭液为含1％牛血清白蛋白和10％ ～ 20％小牛血清的PBS,酶标抗体稀释度为1∶80 ～1∶320,显色时间3～5min.R-Dot-ELISA与ELISA法相比,检测结果一致率为95.4％(r=0.907,P＜0.05),与免疫荧光法相比,检测结果一致率为96.7％(r=0.932,P＜0.05).结论 R-Dot-ELISA检测ANA具有较高的敏感性及特异性,且快速、简便,适用于基层流行病学调查和临床快速诊断.
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